产品简介

Bradford法蛋白定量试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)是最常用的蛋白浓度检测方法之一。考马斯亮蓝测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质—色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝结合在2分钟左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1小时内保持稳定。该法操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，检测浓度下限达到25μg/ml，最小检测蛋白量达到0.5μg，待测样品体积为1-20μl。在50-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。

使用方法

1. 试剂准备：将所有试剂(G250 染色液、BSA 溶液、样品)平衡至室温。

2. 标准品准备：取 50 μl BSA 溶液(2 mg/ml)，用溶解蛋白样品的缓冲液稀释至 200 μl，终浓度为 0.5 mg/ml。为了简便起见，也可以用生理盐水或 PBS 稀释标准品。

3. 标准曲线设置参考如下。标准品的用量分别为0、1、2、4、8、12、16和20 μl，加标准品稀释液补足到20 μl。推荐设两个重复。

4. 样品孔中加入20 μl待测样品。如样品浓度过高，可适当稀释，使之落在标准曲线范围内。

5. 每孔加入200 μl G250染色液，室温放置2 - 5分钟。

6. 用酶标仪测定OD595，或560 - 610 nm之间的其它波长的吸光度。

7. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。

注意事项

1. 将G250染色液回复到室温颠倒3-5次，混匀再使用，有利于提高检测的灵敏度。

2. 蛋白标准溶液请在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。

3. 需可检测560-610nm之间波长的酶标仪一台，最佳检测波长为595nm。并需96孔板。

4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。