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免疫荧光(IF)

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实验原理

免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。


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样本运输保存


实验项目标本要求标本保存运输条件可能存在风险备注
石蜡切片客户提供石蜡切片的,该切片放置时间不能超过半年常温放置超过了半年的石蜡切片存在抗原丢失的可能性,结果可能为阴性或阳性较低如果有蜡块最好提供蜡块重新切片
冰冻切片1. 厚度不要超过10um;
2. 提供的冰冻切片放置时间不能超过三个月;
-20℃1.20um厚的冰冻切片, 很容易掉片。
2、20um 厚的冰冻切片抗体不易进入导致假阴性结果
3. 放置超过三个月的冰冻切片,抗原丢失很严重。
1. 提供组织样品改做石蜡切片或者重新冰冻切片8-10um。
2. 放置超过三个月的切片建议重新切片
细胞爬片1. 细胞密度合适(最好是105),状态要好。
2. 最好爬在24*24 的爬片上,不要把细胞直接爬在板子上,组化不接12 孔板或者孔径更小的培养板
4℃,只要不是一定要做活细胞的项目,建议固定好细胞, 换成PBS 运输。爬片操作过程中 ,细胞不可避免的会有少数脱落。如果原本细胞数量就少,那么做完后,可能会发现细胞没了。1.超过一周的细胞爬片,可能长菌。爬片一次性做完,保存不超过一周。
2. 细胞数量:6 孔板细胞密度到达50%~70%。
3. 细胞没有制成爬片,直接长板孔,不能封片拍照。
细胞悬浮液, 做滴片细胞固定好,换成PBS,离心后要保证细胞沉淀至少肉眼可见把细胞悬浮液用EP 管装着, 4℃保存运输有的客户提供的细胞量太少,离心后,看不到明显沉淀,滴片制好后, 发现没细胞离心后需肉眼可见细胞沉淀。
价格

服务项目价格
免疫荧光单标(双色)+DAPI80元/张
免疫荧光双标(三色)+DAPI100元/张
免疫荧光三标(四色)+DAPI250元/张
免疫荧光四标(五色)+DAPI550元/张
芯片免疫荧光单标(双色)+DAPI400元/张
芯片免疫荧光双标(三色)+DAPI500元/张