实验原理
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。
样本运输保存
实验项目 | 标本要求 | 标本保存运输条件 | 可能存在风险 | 备注 |
石蜡切片 | 客户提供石蜡切片的,该切片放置时间不能超过半年 | 常温 | 放置超过了半年的石蜡切片存在抗原丢失的可能性,结果可能为阴性或阳性较低 | 如果有蜡块最好提供蜡块重新切片 |
冰冻切片 | 1. 厚度不要超过10um; 2. 提供的冰冻切片放置时间不能超过三个月; | -20℃ | 1.20um厚的冰冻切片, 很容易掉片。 2、20um 厚的冰冻切片抗体不易进入导致假阴性结果 3. 放置超过三个月的冰冻切片,抗原丢失很严重。 | 1. 提供组织样品改做石蜡切片或者重新冰冻切片8-10um。 2. 放置超过三个月的切片建议重新切片 |
细胞爬片 | 1. 细胞密度合适(最好是105),状态要好。 2. 最好爬在24*24 的爬片上,不要把细胞直接爬在板子上,组化不接12 孔板或者孔径更小的培养板 | 4℃,只要不是一定要做活细胞的项目,建议固定好细胞, 换成PBS 运输。 | 爬片操作过程中 ,细胞不可避免的会有少数脱落。如果原本细胞数量就少,那么做完后,可能会发现细胞没了。 | 1.超过一周的细胞爬片,可能长菌。爬片一次性做完,保存不超过一周。 2. 细胞数量:6 孔板细胞密度到达50%~70%。 3. 细胞没有制成爬片,直接长板孔,不能封片拍照。 |
细胞悬浮液, 做滴片 | 细胞固定好,换成PBS,离心后要保证细胞沉淀至少肉眼可见 | 把细胞悬浮液用EP 管装着, 4℃保存运输 | 有的客户提供的细胞量太少,离心后,看不到明显沉淀,滴片制好后, 发现没细胞 | 离心后需肉眼可见细胞沉淀。 |
服务项目 | 价格 |
免疫荧光单标(双色)+DAPI | 80元/张 |
免疫荧光双标(三色)+DAPI | 100元/张 |
免疫荧光三标(四色)+DAPI | 250元/张 |
免疫荧光四标(五色)+DAPI | 550元/张 |
芯片免疫荧光单标(双色)+DAPI | 400元/张 |
芯片免疫荧光双标(三色)+DAPI | 500元/张 |