1.基本原理
免疫沉淀是利用抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后,再与蛋白A/G(ProteinA/G)或二抗偶联的agaose或Sepharose珠子孵育,通过离心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗体-目的蛋白复合物,沉淀经过洗涤后,重悬于电泳上样缓冲液,煮沸5-10min,在高温及还原剂的作用下,抗原与抗体解离,离心收集上清,上清中包括抗体、目的蛋白和少量的杂蛋白。
2.样本要求
客户需提供样品:
新鲜或正确保存的组织、细胞或蛋白样品,组织样品:动物组织>400mg/样品,植物组织>2g/样品;细胞样品:>2×107 细胞数/样品;蛋白样品:裂解样品总蛋白量>2ml/样品。
客户提供目的蛋白和互作蛋白的详细信息,包括蛋白种属、大小、参考文献等。
建议客户提供目的蛋白阳性对照。
客户需提供符合免疫共沉淀技术要求的浓缩或即用型抗体,也可科杰生物代购;若因客户抗体原因导致实验失败,由此造成的损失由客户承担。3.交付内容
完整的实验报告及分析
真实的原始实验数据
详细的实验步骤