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免疫共沉淀CO-IP

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免疫共沉淀

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)技术是以抗原、抗体间的特异性免疫反应为基础,研究蛋白质间相互作用的经典方法。与其它研究蛋白质相互作用的方法相比,免疫共沉淀是在生理条件下检测蛋白质间相互作用,因此,不仅可以检测到体内形成的天然复合体,而且可排除过表达靶蛋白所带来的假阳性;由于内源性的靶蛋白是完全加工、修饰成熟的蛋白质,因此,依赖于修饰的蛋白质间相互作用也可以被检测到。

实验原理

免疫共沉淀技术原理是以细胞内源性靶蛋白(protein X)为诱饵,将protein X的抗体与细胞总蛋白进行共孵育,促进免疫复合物的形成;随后加入能够与抗体Fc段结合的protein A/G(预先结合固化在琼脂糖微珠上),这样在protein X所在的环境中与其有相互作用的蛋白(protein Y)会被一起沉淀下来,形成"结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-protein A/G微珠"复合物,纯化该复合物后凝胶电泳分离蛋白,应用Western blot 或者质谱技术鉴定靶蛋白的结合蛋白。

2.样本要求

客户需提供样品:

新鲜或正确保存的组织、细胞或蛋白样品,组织样品:动物组织>400mg/样品,植物组织>2g/样品;细胞样品:>2×107 细胞数/样品;蛋白样品:裂解样品总蛋白量>2ml/样品。

客户提供目的蛋白和互作蛋白的详细信息,包括蛋白种属、大小、参考文献等。

建议客户提供目的蛋白阳性对照。

客户需提供符合免疫共沉淀技术要求的浓缩或即用型抗体,也可科杰生物代购;若因客户抗体原因导致实验失败,由此造成的损失由客户承担。


3.交付内容

  完整的实验报告及分析

  真实的原始实验数据   

  详细的实验步骤