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胰蛋白酶-EDTA (0.25%),含酚红

货号:C055-100,C055-500

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胰蛋白酶-EDTA (0.25%),含酚红
0.25% Trypsin-EDTA Solution(With Phenol Red)
产品类型细胞培养解离试剂
目录号C055-100,C055-500
保存方法-5℃至-20℃
产品规格100ml,500ml
螯合剂EDTA
pH 范围7.2 - 8.0
运输条件湿冰
经过测试体外生物检测
数量100mL
细胞类型哺乳动物
形式液体
酚红指示剂酚红
有效期24 个月
产品简介胰蛋白酶(Trypin)是一种丝氨酸水解酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切段,水解细胞间的蛋白质,破坏细胞间的连接,从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。胰酶分散细胞的活性与组织或细胞的特性、胰酶浓度、温度和作用时间有关,在PH 8.0和37℃时,胰酶的作用能力最强,因此使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。  一般常用胰酶的工作浓度为0.25%,而半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用低浓度(0.05%)的胰酶进行细胞消化。由于EDTA能够螯合Ca2+和Mg2+,从而破坏细胞连接促进细胞的解离,因此在胰酶溶液中常常会加入一定量的EDTA混合使用,以增强解离效果。
使用方法1、贴壁细胞的消化:
(1)吸除培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
(2)加入少量Trypsin-EDTAsolution,略盖过细胞即可,室温放置0.5~2min,不同的细胞消化时间有所不同。
(3)显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
(4)如果发现消化不足,则加入Trypsin-EDTAsolution重新消化。
(5)如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。
2、组织的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项1.在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
2.胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用建议1.如果希望消化能力比较强,推荐使用含有 EDTA 的胰酶消化液,消化能力相对更强一些。
2. 如果希望观察比较方便,推荐选择含酚红的胰酶消化液。
3. 对于酚红可能会干扰后续的测试分析,推荐选择不含酚红的胰酶消化液。
4. 对于 EDTA 可能会干扰后续的测试分析时,推荐不含 EDTA 的胰酶消化液。