Cloud Zoom small image

BCA蛋白浓度测定试剂盒

货号:KWB011

规格:500次

包装:盒


现价   268.00
¥179
节省
¥447
市场价格
当前销售数量: 370
折扣:6
数量:

库存25

  • 详情
  • 特别提示
  • 评价
  • 说明书下载

BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成,实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和高兼容性。

组成与储存:(500次)

(1) BCA试剂A,室温保存;

(2) BCA试剂B,室温保存;

(3) BSA标准品,−20ºC冻存。12个月有效。

(4) 蛋白标准配制液 4℃保存


使用说明:
1.蛋白标准品的准备
a.取1.2ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准(30mg BSA)中,充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即使用,也可以-20℃长期保存。
b.取适量25mg/ml蛋白标准,稀释至终浓度为0.5mg/ml。例如取20μl 25mg/ml蛋白标准,加入980μl稀释液即可配制成0.5mg/ml蛋白标准。蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。稀释后的0.5mg/ml蛋白标准可以-20℃长期保存。
2.BCA工作液配制
根据样品数量,按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀。例如5mlBCA试剂A加100μl BCA试剂B,混匀,配制成5.1ml BCA工作液。BCA工作液室温24小时内稳定。


3.蛋白浓度测定
a.将标准品按0、1、2、4、8、12、16、20μl加到96孔板的标准品孔中,加标准品稀释液补足到20μl,相当于标准品浓度分别为0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。
b.加适当体积样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足20μl,需加标准品稀释液补足到20μl。请注意记录样品体积。
c.各孔加入200μl BCA工作液,37℃放置20-30分钟。
注: 也可以室温放置2小时,或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。
d.用酶标仪测定A562,或540-595nm之间的其他波长的吸光度。
e.根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品的蛋白浓度。


注意事项:
需酶标仪一台,测定波长为540-595nm之间,562nm最佳。需96孔板。如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但测定时,需根据比色皿的最小检测体积,适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积,样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景。

为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热,但是切勿过热。
EDTA浓度必须小于10mM,不兼容EGTA。不适用BCA法时

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。