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利用流式细胞分选仪，以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒，测量其产生的散射光和发射荧光的强度，从而对细胞（或微粒）的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术，它可根据发射光的荧光强度和波长将发光颗粒亚群分开并可实现免疫细胞亚群分选、肿瘤干细胞分选、造血干细胞分选、GFP阳性细胞分选、侧群SP细胞分选等，得到高活性、高纯度的目标细胞，继续无菌培养，或用于下游PCR、RNA-Seq、FISH等实验。

送样要求

实验流程

获取细胞悬液→荧光抗体染色→调整细胞浓度（如HUH7， 建议300-400w/ml）→过滤细胞→移入流式管→避光置冰上运至分选室→上机检测并设定分选条件→分选细胞→上机回测，检测纯度。

注：分选前的细胞一定要过滤过（一般用300目滤网），否则会堵机器的。

流式抗体的选择

（1）选择荧光时首先应确认能被流式细胞仪上所配置的激光激发；

（2）激发光谱必须在仪器上滤光片能够接受的合适范围内；

（3）尽量使用已经用荧光素标记好的单克隆抗体；

（4）如果是单色实验，荧光素的亮度越强越好；

（5）如果是多色实验，除了避免使用光谱高度重叠的荧光素外，还应搭配染色指数。简单来说，就是用亮度强的荧光素标记抗体水平低的抗原，而用较弱的荧光素标记抗体水平高表达的抗原。

抗体需要客户提供吗？

本公司备有biolegend和BD的常用流式抗体

哪些情况下必须用流式细胞仪来进行细胞分选？

（1）要求目标细胞群有极高的纯度（95%-100%）；

（2）需要分选低密度表面受体/抗原的细胞（弱阳性细胞）；

（3）需要根据表面受体密度的差别来分离不同细胞（根据免疫表型的分选、抗体亲和力进化等）；

（4）需要依据多色荧光标记来分选细胞；

（5）根据某些细胞内部标志，如DNA含量、包内抗原等分离细胞；

（6）多孔板分选。如96孔板或384孔板中精确的分选出1个细胞；

（7）分选含量极低的细胞（0.001%或更低），流式可分选出百万分之一的稀有细胞。