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产品名称: 原代及干细胞鉴定
单位:
原代及干细胞鉴定
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利用流式细胞分选仪,以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它可根据发射光的荧光强度和波长将发光颗粒亚群分开并可实现免疫细胞亚群分选、肿瘤干细胞分选、造血干细胞分选、GFP阳性细胞分选、侧群SP细胞分选等,得到高活性、高纯度的目标细胞,继续无菌培养,或用于下游PCR、RNA-Seq、FISH等实验。

根据上述流式细胞术原理对原代及干细胞鉴定特异性表面标记进行分析、鉴定

方案推荐

检测细胞

推荐检测指标

间充质干细胞(MSCs 

表达CD73CD90CD105CD44,不表达CD45CD34CD14CD11bCD19HIL-DR

肿瘤干细胞(CDCs)

CD24CD44CD133CD271CD304CD326 

国际细胞治疗协会间充质和组织干细胞委员会2006年提出了MSC鉴定的最低标准,关于细胞表型的要求是表达CD90, CD105和CD73,不表达CD45, CD34, CD14或CD11b, CD79a或CD19和HLA-DR;阳性指标都需要染色,阴性指标一般选择2-3个指标,因为是做细胞表型鉴定,所以要配齐同型对照。为保证所得结果的可靠性,每次实验前应用标准荧光微球检测仪器的变异系数。每次应做阴性对照、阳性对照、质控对照、以确保将各种试剂及操作过程对结果的影响降至最低

样品采集和送样要求

细胞样本:需为单细胞悬浮状态,1-3*10的6次方个,细胞状态良好,活率95%以上,无污染。
外周血:24h内采集的EDTA或肝素抗凝全血5ml左右,无对人体有害的病原体污染。
新鲜组织:2h内采集的小鼠、大鼠等脾、骨髓、胸腺、淋巴结等新鲜组织大约50mg。

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